Міжрегіональне співробітництво України з Чеською Республікою здійснюється у рамках двосторонніх угод між регіонами України та Чехії.

На міжрегіональному рівні укладено понад 30 угод про співпрацю та партнерські відносини, а також встановлено контакти між 6 областями України та 10 краями Чеської Республіки.

З перших днів російського вторгнення регіональні органи влади Чехії активно долучилися до надання масштабної гуманітарної та фінансової допомоги Україні.

Одним з актуальних завдань є подальший розвиток контактів між Асоціацією міст України та Асоціацією міст Чеської Республіки, а також підписання меморандумів про співпрацю між українськими та чеськими містами, що сприятиме ефективній двосторонній міжрегіональній взаємодії, зокрема у рамках відбудови України.