Правовою основою двостороннього співробітництва в галузі культури є Угода між Міністерством культури України та Міністерством культури Чеської Республіки про співробітництво в галузі культури (від 15.12.2016 р.).
Протягом останніх років в Чеській Республіці були реалізовані десятки проєктів в рамках культурної дипломатії. За сприяння Посольства Україна була представлена на більшості чеських найвідвідуваніших фестивалів, ярмарків та виставок у сферах книговидавництва, туризму, кіноіндустрії.
За організаційної участі Посольства проводяться Тижні українського кіно, конкурси перекладачів з української на чеську мову, конференції україністів, з метою популяризації української літератури надається підтримка на здійснення перекладів творів української літератури на чеську мову; організовуються мистецькі заходи та фотоекспозиції, виступи провідних українських музичних виконавців; реалізовуються соціальні проєкти; відзначаються пам’яті дати в історії України та традиційні українські свята; вживаються заходи з метою збереження та впорядкування українських місць пам’яті на території ЧР.
Після повномасштабного вторгнення Росії в Україну чеські митці, режисери та музиканти активізувалися на підтримку України та українців у Чехії. Після 24 лютого 2022 року відбулися десятки благодійних концертів, кінопоказів, аукціонів з творами мистецтва, виручені кошти з яких було спрямовано на гуманітарні проєкти чи на підтримку Збройних Сил України.
Окремі чеські новинні сайти почали випускати спеціальні україномовні програми для українців у Чехії, зокрема, Чеське телебачення забезпечує синхронний переклад головного вечірнього випуску новин. У Празі на базі чеського FM-радіо розпочало трансляцію україномовне "Радіо Україна" radioukrajina.cz. Новинний портал Seznam Zprávy відкрив нову рубрику новин українською мовою. Читати новини українською ви можете за посиланням: Новини українською. Редакція газети BLESK запустила україномовну редакцію: https://proukrainu.blesk.cz/
Основними напрямами двостороннього співробітництво в галузі освіти є розвиток співпраці між вищими навчальними закладами двох країн та здійснення обмінів освітянами з метою вивчення та обміну досвідом.
Зокрема, спільні науково-дослідні проекти реалізовують: Київський національний університет імені Т.Шевченка та Технологічний університет м. Брно; Херсонський державний університет та Інститут ботаніки Академії наук ЧР; Київський національний університет імені Т.Шевченка та Інститут органічної хімії та біохімії ЧР; Інститут фізики напівпровідників імені В.Є.Лашкарьова НАН України та Інститут фізики Карлового університету; Фізико-технічний інститут низьких температур імені Б.І.Вєркіна НАН України та Інститут фізики матеріалів Академії наук ЧР; Київський національний університет технологій та дизайну та Технічний університет м. Ліберець; Львівський національний університет імені Івана Франка та Карлів університет; Національний університет біоресурсів і природокористування України та Університет імені Томаші Баті м. Злін; Інститут проблем матеріалознавства імені І.М.Францевича НАН України та Технологічний університет м. Брно; Інститут хімії поверхні імені О.О.Чуйка НАН України та Технічний університет м. Острава,Національний педагогічний університет імені М.Драгоманова та університет Палацького в м. Оломоуц.
У 2022 році було підписано Угоду про співробітництво в галузі освіти та науки між Міністерством освіти і науки України та Міністерством освіти, молоді та спорту Чеської Республіки. Чотири провідні університети України увійшли до кластеру східного партнерства за ініціативи Карлового університету у Празі.
В рамках Меморандуму про взаєморозуміння між Міністерством освіти і науки України та Чеською агенцією розвитку протягом останніх років чеськими фахівцями було здійснено низку візитів в Україну з метою проведення тренінгів та надання експертної допомоги зі створення програм та вироблення критеріїв оцінювання якості загальної середньої освіти. Українські освітяни перебували в Чехії з метою вивчення чеського досвіду управління навчальними закладами, організації інклюзивної та позашкільної освіти, розвитку системи оцінювання якості освіти.
Після повномасштабного вторгнення Росії в Україну вищі навчальні заклади Чеської Республіки анонсували програми підтримки для українських студентів, викладачів та абітурієнтів, а також встановили особливі правила вступу до ВНЗ Чехії для українських студентів, спростивши порядок нострифікації документів про освіту. Крім цього, Уряд Чехії заборонив начатися на технічних спеціальностях ВНЗ Чехії студентам з Росії та Білорусі, оскільки існує загроза, що в майбутньому ці фахівці продовжать роботи в ВПК ворожих держав.
Сайт для українських студентів і абітурієнтів про навчання в Чехії: https://www.msmt.cz.
З метою забезпечення згуртованості молоді та української громади в Чеській Республіці Посольством на постійній основі здійснюється робота з метою активного залучення української молоді в країні перебування до освітніх та культурно-просвітницьких заходів, що проводяться Посольством у співпраці з українською діаспорою. Ведеться активна співпраця з українськими освітніми закладами в Чеській Республіці, зокрема із суботніми українськими школами «Ерудит», «Українська школа в Празі», «Ниточка родоводу», українськими культурно освітніми центрами «Крок» та «Українська ініціатива Південної Моравії», центром дозвілля «Джерело». В Чехії створюються нові громадські молодіжні організації, які активно долучаються до реалізації різноманітних заходів публічної дипломатії, патріотичних та волонтерських проєктів, які організовуються дипустановою.